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唾液检测猪病尚需建立评判标准
2014-02-10  点击数:

        血清学检测在猪群免疫监测和疾病诊断中发挥着重大作用,但由于血液采集对技术要求较高,必须具备专用的血清分离设备(如离心机等),且操作程序复杂,况且一旦发生溶血或污染,对检测结果影响较大。人们一直期望有新的检测方法,唾液学方法是其中较有发展前景的方法之一。实际上,在美国已经将唾液用于检测PRRS病毒,而在人医上,唾液已经应用到检测艾滋病。人们习惯的血清学检测由于对血液采集技术要求高,对猪应激大,一些猪场往往只在发病时才对猪群进行检测,因此,如果唾液检测法能适用,十分值得推广。但行业内专家则认为,唾液检测相关标准尚未建立,运用到养殖一线还需要时间。

 

 

        近年来,不少养殖场都会通过抗原抗体检测的方法,评估场内猪群的健康状况。其中最大工作量就是采血,一来对工人技术要求较高,二来猪群应激较大。在第22届世界猪病大会上,美国有专家通过实验指出,用唾液样本做蓝耳、猪瘟抗原与抗体的检测,可以达到用血液做样本检测的效果。

 

       对此,爱德士南中国区负责人吴俊博士认为,如果能建立唾液样本检测的评价标准,唾液检测法有一定的可行性。而农业部种猪测定中心(广州)实验室主任樊福好博士则认为,用唾液取代血液,作为检测样本,受到的干扰因素太多,实验可重复性不强。

 

       据樊福好博士介绍,唾液采集的方法非常简单,利用猪只的好奇心理以及嗜好咀嚼的特性,采用纱布球采集唾液。将纱布制作成纱布球固定于金属线前端,猪只会主动咀嚼纱布球,唾液将通过虹吸现象进入纱布球内。将纱布球内的唾液挤压出,释放至样品袋内。将样品袋内的唾液转移至离心管内。“比采血简单得多,但该方法有太多的不稳定因素,需要专家学者进一步研究。”樊福好认为,该方法虽然方便简洁,但空白内容很多,因此该方法在国外于2009年左右提出之后,一直也是处于研究性阶段,暂时尚未运用到生产实际当中。

 

       对此,吴俊认为最大的问题是评判标准。“不能用血液指标去判定。”据吴俊介绍,唾液也是体液的一种,能反映一定的生理生化指标,但不能用血液的评判标准去判定唾液样本中的阴阳性。比如,在血液样本中,蓝耳的评判指标是OD值大于0.4为阴性,而小于0.4为阳性;在唾液中抗原、抗体含量相应会比在血液中低,因此,分界点肯定不是0.4,究竟是多少,需要通过大量的实验获得。

 

    “在抗原方面的检测可以实行,但受环境的污染较大,”吴俊指出,这种方法只能测定群体而无法得知个体情况,因同一窝的猪,每个都有可能咬那悬挂的棉球,同时很容易受周边环境的污染,而发生非特异性反应,最终导致结果出现误差或不稳定。

 

       对于使用唾液做检测试验,樊福好认为误差较大。据樊福好介绍,在两年前曾经做过类似的实验,收集猪体的唾液,做抗体的检测。“能检测到抗体水平,但误差比较大。”樊福好说,唾液样本的量直接影响实验结果,同一猪体,采集得多与少,实验的结果都不同;并且采集的时间不同,实验结果也不同。所以采集样本时,最好统一前提标准:比如采集前不允许喝水,或是只咀嚼2个小时。

 

       据樊福好分析,由于唾液中的抗体和血液中的抗体不是同一个概念,必须避免对使用血清抗体的理解来解释唾液中抗体的作用。血清中的抗体大部分为循环抗体,而唾液中的抗体为分泌抗体,两者的作用不同,与抗原的相关性也存在一定差异。

 

        虽然唾液检测存在这样或是那样的疑问,吴俊博士认为,这将是一种趋势,毕竟国外越来越推行福利养猪,采血无论对个体或是群体的应激都比较大。据勃林格殷格翰动物保健品有限公司亚洲区市场部负责人吴瀚木博士(Harm Voets DVM)介绍,在美国,不断有养殖场在尝试这种唾液检测法。樊福好博士亦认为,如果建立了该方法的相关评判标准,唾液检测是很值得推广并且对养殖场很方便的技术。

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