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禽流感检测方法对比
2012-03-30  点击数:

选自《三种检测禽流感抗体方法的比较》
2012-3-27
2 结果
三种检测方法HI(血凝抑制实验)、GICA(免疫层系
胶体金实验)、AGID(琼脂扩散实验),对342 份鸡血清的检测结果见表1, 共检出HI 阳性269 份, AGID 阳性203 份, GICA 阳性239 份。阳性检出率以HI 试验为最高, 为78.65%( 269/342) , 其次为GICA 69.88%( 239/342) 和AGID试验为59.36%( 203/342) 。由表2 可见, 在269 份HI 阳性血清中, 有GICA 阳性236 份; 有AGID 阳性203 份; 73 份HI 阴性血清, AGID 试验均呈阴性, 其中有3份GICA 阳性, HI 与GICA 法的符合率为89.47%。在203 份AGID 阳性血清中, 有194 份GICA 阳性,139 份AGID 阴性血清中有GICA阴性94 份, GICA 与AGID 符合率为84.21%。HI 与AGID 的符合率为80.70%。可见GICA 和HI 有较高的符合率, 但其敏感性较HI 试验低; 在239 份GICA 阳性血清中, 有AGID 阳性194 份, 可见GICA 的敏感性高于AGID。

3 讨论
就GICA, HI、AGID 三种方法而言, HI 试验虽然比较敏感, 直接反映抗体水平, 但因HA 亚型局限性及神经氨酸酶的空间位阻作用影响HI 的实用性。AGID 试验虽然对条件要求低, 便于操作, 但敏感性差, 所以不适于掌握疫情, 而且对于大量样本的操作又显得费时费力。GICA 敏感性相对较高, 试验程序简单, 适合于大面积检测, 而且不要求重复确定抗原滴度或是对血清进行预处理, 在使用操作的过程中, 人为影响因素少, 减少了试验失误, 因此与HI、AGID 试验相比更适合于大批血清学调查。虽然血凝抑制试验是检测抗A型流感病毒抗体的标准方法, 在一些情况下, 它不能检测到自然感染流感病毒后产生的抗体。这可能是由于A 型流感病毒年复一年抗原漂移导致的抗原性变异[4],因此使用标准的血凝素抗原试剂不能检测到感染变异的A 型流感病毒后所产生的抗体, 而且并非所有感染的禽类都会产生血凝抑制抗体[5]。在本试验中, GICA 采用杆状病毒表达的重组核蛋白作为抗原, 试纸条制备以及检测过程中均不涉及全病毒, 具有较好的生物安全性。GICA 的检测对象是针对A 型流感病毒核蛋白的抗体, 具有型特异性;而HI 试验检测的是针对A 型流感病毒表面血凝素蛋白抗原的抗体,为保护性中和抗体, 且具有亚型特异性。据此认为GICA 和HI 检测
禽流感抗体的结果可能并不具有平行相关性。GICA 和AGID 试验所用抗原均为杆状病毒表达的AIV 核蛋白重组抗原, 检测对象是针对流感病毒内部的核蛋白抗原产生的抗体。据此推断, GICA 和AGID 试验有较好的符合率。在本试验中GICA 的敏感性明显高于AGID 试验, 且符合率较好。GICA 本身具有较高的敏感性, 是因为硝酸纤维素膜有很好的吸附蛋白、滤过水分和浓缩聚焦等作用[6~7], 因此, 尽管包被抗原用量很少, 但硝酸纤维素膜检测线上的抗原浓度较高, 使得GICA 方法具有较高的敏感性。

 

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