联系我们

地 址:上海市浦东新区新场镇仁义村901号
电 话:021-5094 7188
传 真:021-5094 7186
网 址:www.quicking.cn
Email: quicking@quicking.cn
您当前的位置:首页 > 技术资料 > Q&A犬猫弓形虫病的快速诊断与预防
犬猫弓形虫病的快速诊断与预防
2014-07-18  点击数:
中文-弓形虫生活史.png
1 弓形虫病概述
弓形虫病又称弓形体病、弓浆虫病,是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的一种人畜共患寄生虫病。弓形虫分布呈世界性,据报道全球约1/3的人感染弓形虫,我国人群的平均感染率也高达12.3%[1]。弓形虫可寄生于感染生物的除红细胞外的所有有核细胞中,猫及其他猫科动物是弓形虫的终末宿主。感染的猫及猫科动物粪便中含有大量卵囊,在适宜条件下,可在自然界较长时间保存下来。弓形虫寄生的中间宿主范围很大,除了人和猫以外,猪、牛、羊及犬等多种动物感染弓形虫病已经是普遍现象,并且没有地域性、季节性,与性别也无关。污染了卵囊的食物、粪便、飞沫,以及密切接触感染动物和节肢动物叮咬都可以引起弓形虫的传播。与猫接触是人类感染弓形虫病的主要原因。临床上,免疫功能正常的人群感染后,通常无症状;免疫功能受损或缺陷者,体内则可引起眼部和中枢神经系统损害乃至全身性弓形虫病,严重时可致患者死亡[2]。孕妇感染弓形虫可导致流产、畸胎和死胎。犬、猫多为隐性感染,也有的出现临床症状甚至死亡[3]。随着宠物的增多,宠物相关的人兽共患传染病不可避免地威胁着人类的健康,人们对于弓形虫病等及其快速检测方法的关注也不断升温。
在目前尚无特效弓形虫治疗药物和疫苗的情况下,通过先进的检测手段做出诊断是有效预防弓形虫病流行的重要方法之一。国内外学者现已建立多种检测弓形虫抗原或抗体的方法,如病原学检测、间接血凝检测、间接免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验、PCR检测等,但这些方法操作较复杂,需要专业实验室完成检测;费时长且需要一定的仪器设备,在临床推广应用中受到一定的限制。因此,建立专用于犬猫弓形虫病的简易、快速、特异诊断方法,不仅有助于了解犬猫感染情况,同时对于阻断病原向人的传播也具有重要意义[4]
2 弓形虫病的快速诊断
2.1 弓形虫病临床诊断方法的原理
目前,免疫学方法是应用于弓形虫病临床诊断最广泛的方法。诸多的免疫学方法都是建立在抗原-抗体特异性免疫反应的基础上。比如,ELISA方法是利用酶的催化作用和底物放大的反应原理,提高了特异性抗原-抗体免疫反应检测的敏感性,与其他血清学诊断方法相比,具有可重复好、易自动化和和标准化的特点,可用于定性和定量检测。免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物,应用于抗原-抗体反应中的一种新型免疫标记技术。胶体金具有胶体稳定性、蛋白质强吸附性和高电子密度等特性,在金标蛋白结合处,显微镜下可见黑褐色颗粒。当标记物在相应配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而可用于定性或半定量的快速免疫检测方法中[5]。该技术作为一种新的免疫学方法,目前已广泛应用于临床诊断、病原微生物和兽药残留检测。
弓形虫的免疫学诊断包括弓形虫抗原和弓形虫抗体的检测两种方法。弓形虫感染后,机体内相继出现多种抗体,如IgM、IgG、IgA、IgE等。感染后7-8天出现的IgM是最早出现的抗体,因此IgM检测常用于弓形虫病的早期诊断。IgG抗体在感染后2-4月可达到高峰,且持续时间较长,但是IgG抗体检测阳性无法确定是否为感染期;IgA抗体也是弓形虫感染早期的一个重要标志物,在IgM消失IgG尚未出现之前,测定IgA可以提高弓形虫急性感染的检出率[6, 7]
弓形虫抗原检测的对象一般是循环抗原(Circulating antigen, CAg)或CAg免疫复合物。弓形虫感染早期、急性期或活动期,血液和体液中可存在大量的速殖子、包囊、虫体的代谢产物或裂解产物,即弓形虫CAg。CAg出现的时间比特异性抗体IgG、IgA、IgM早,是弓形虫病原体存在的直接证据,亦是确诊弓形虫感染的可靠指标。CAg既是早期或现症感染的指标,同样也是治疗效果评价的直接证据。先天性弓形虫病和免疫功能缺陷的个体,即使是急性弓形虫感染,血清抗体水平也很低甚至可能不出现特异抗体,此时CAg检测的阳性结果就会真实地反映机体的感染状态,这对于个体检查十分重要。
2.2 弓形虫快速诊断方法的应用
对于宠物医疗机构来说,检测方法的方便性、快速性和准确性是弓形虫病诊断首先要考虑的问题。胶体金免疫层析试纸条检测,由于操作简单、灵敏度高、检测结果直观,已成为快速诊断弓形虫病的首选方法。卓国荣在华中农业大学证实了免疫胶体金快速诊断试纸与IHA试剂盒符合性好 [5]。代飞燕等更证实了免疫胶体金试纸的敏感性高于正向间接血凝试验的敏感性[6]
临床上,犬猫弓形虫病的诊断首先要根据宠物主人的介绍、临床症状等进行类症鉴别,再结合实验室手段进行确诊。猫的急性弓形虫病表现为发热,体温常在40℃以上,呈稽留热,有时出现呕吐和腹泻。慢性病症可见消瘦、贫血等;孕猫可发生死胎和流产。犬弓形虫病因缺乏特异性临床症状和体征,诊断较为困难,尤其应与犬瘟热和犬传染性肝炎鉴别诊断。
2.2.1 犬瘟热的鉴别
犬弓形虫病在1岁以下犬多发,临床症状上易与犬瘟热特别是神经型犬瘟热相混淆。患弓形虫病的犬体温升高呈稽留热,维持在40℃~42℃,而犬瘟热早期呈典型的双相热,即病初高达40℃左右,持续1~2天后降至常温,2~3天后再次升高。犬弓形虫病典型症状为肺炎(带有脓性鼻液)、弓形虫性肌炎和肌肉麻痹,在病程后期常造成局部组织出血坏死,如背部及腹部皮肤出血形成坏死灶。而犬瘟热主要是神经炎症反应(肌肉震颤)和呼吸道症状(脓性鼻液,鼻尖形成结痂),并不出现皮肤的出血、坏死。使用胶体金试纸卡诊断时,先通过血细胞计数,当白细胞减少、中性粒细胞增加,采用犬弓形虫抗原快速检测试纸结果为阳性时即可确诊为弓形虫感染。若白细胞数下降,并有犬瘟热症状时,则可能是犬瘟热与犬弓形虫病混合感染,此时可采用犬瘟热病毒与犬弓形虫抗原快速检测试纸二联检测卡检测进行确诊。
2.2.2 与犬传染性肝炎的鉴别
犬弓形虫病出现的高热稽留、贫血、腹泻等症状易被误诊为犬病毒性肝炎。犬传染性肝炎以胃肠炎和角膜混浊症状为主,高热稽留的同时呈现渴感明显,有黄疸症状,出血后凝血时间延长,剖检可见有肝脏、胆囊的病变及体腔血样渗出液,这些特点与犬弓形虫病不同。采用弓形虫抗原快速检测试纸或弓形虫抗原与犬传染性肝炎的二联检测卡加以鉴别诊断。
3 弓形虫病的预防及治疗
弓形虫病是人畜共患病,不仅危害着孕期妇女和胎儿的健康,也对畜牧业有着重要的影响,更造成了人与宠物相处的关系紧张。实际上,无论弓形虫在人和动物间传播方式如何,均可归因于污染了弓形虫卵囊的环境。通过科学的饲养方式和树立良好的防疫观念,完全能够阻断弓形虫的传播。
1、科学饲养宠物,避免携带弓形虫的宠物传播病原。很多学者认为经肠道感染可能是犬弓形虫病的主要感染形式。犬主人在携犬外出时应行牵引,以避免犬在外捡食或接触流浪猫排泄物,在家喂以熟食和成品狗犬粮。猫要养在家里,喂熟食或成品猫粮,不让它们在外捕食或与野猫接触,及时清除猫的粪便,接触动物排泄物后要及时认真洗手。特别需要注意的是,除非孕妇血清检查证明已经有过弓形虫感染,否则孕妇怀孕期间要避免接触猫及其粪便(宠)。
2、做好宠物的弓形虫检测和治疗,从源头上防范人体感染。免疫学的检测方法是间接说明是否有弓形虫的感染,弓形虫抗原或IgM抗体是急性感染后的标志,说明弓形虫处于繁殖的活跃期,这种检测快速简便,可作为弓形虫防治的常规检测手段;而核酸的检测方法是直接检测弓形虫体非常精确,目前已有弓形虫恒温核酸扩增检测的商品化试剂盒可用于弓形虫感染的评价,该方法不仅灵敏、特异,而且无需供助专业设备,结果呈现时采用了胶体金试纸技术,直观、快速、无污染,适用于宠物诊疗机构实验室诊断环境。
实践中对弓形虫病治疗运用比较多的是磺胺类药物,如磺胺嘧啶(SD),还可应用磺胺甲氧嘧啶、乙胺嘧啶等,治疗过程中注意适当补充维生素B1,并保证充足的饮水,一般可取得良好的治疗效果。
3、注意饮食卫生,肉类要充分煮熟,避开生肉污染熟食。食用未煮熟的肉类后感染弓形虫的风险远高于通过宠物的感染,这种重要的传播途径往往被人忽略,造成不可挽回的损失。
 
参考文献
[1] Xiao Y, Yin J, Jiang N, et al. Seroepidemiology of human Toxoplasma gondii infection in China[J]. BMC Infect Dis, 2010, 10: 4.
[2] 鲁燕飞. 弓形虫病的免疫诊断研究进展[J]. 热带病与寄生虫学, 2013, 11, (1): 50-53.
[3] 齐海霞, 张海云, 张宛婧, 等. 宠物(犬、猫)弓形虫病流行病学调查[J]. 中国农资, 2013 (04): 34-35.
[4] 陈光义. 弓形虫病的快速诊断与预防[J]. 中国动物保健, 2013, (10).
[5] Chandler J, Gurmin T, Robinson N. The Place of Gold in Rapid Tests[J]. IVD Technology, 2000, 6(2): 37-49.
[6] Partanen P, Turunen HJ, Paasivuo RT, et al. Immunoblot analysis of Toxoplasma gondii antigens by human immunoglobulins G, M, and A antibodies at different stages of infection[J]. J Clin Microbiol, 1984, 20(1): 133-135.
[7] 蔡亮, 杨秋林. 弓形虫病免疫学诊断研究进展[J]. 中国病原生物学杂志, 2007, 2(3): 233-236.

地址:上海市浦东新区新场镇仁义村901号

电话:021-50947188 传真:021-50947186 邮编:201314 Email: quicking@quicking.cn

上海快灵生物科技有限公司 版权所有 ©2006-2018 沪ICP备07004321号-1